1、概述：

Western印跡法（英語：Western blot），是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法，也是HIV檢測的方法之一。

利用特定抗體能夠專一結合其抗原蛋白質的原理來對樣品進行著色，通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中的表達情況的資訊，來分析檢測特定蛋白質的生物學檢測技術。

發明者一般認為是美國斯坦福大學的喬治·斯塔克（George Stark）。[1]在尼爾·伯奈特（Neal Burnette）於1981年所著的《分析生物化學》（Analytical Biochemistry）中首次被稱為“Western印跡法”。

2、原理：

Western Blot與Southern或Northern雜交方法類似，但Western Blot採用的是聚丙烯醯胺凝膠電泳，被檢測物是蛋白質，“探針”是抗體，“顯色”用標記的二抗。經過PAGE（根據分子大小）分離的蛋白質樣品，轉移到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）上，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質，且能保持電泳分離的多肽型別及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原，與對應的抗體起免疫反應，再與酶或同位素標記的第二抗體起反應，經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術也廣泛應用於檢測蛋白水平的表達。51xxziyuan

3、實驗步驟：

實驗大致分為鑄膠、跑膠、轉漬、接一級抗體、接二級抗體以及壓片幾個部分。

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